लांब पेप्टाइड संश्लेषण समस्या आणि उपाय

जैविक संशोधनात, दीर्घ क्रमासह पॉलीपेप्टाइड्सचा वापर केला जातो.अनुक्रमात 60 पेक्षा जास्त अमीनो ऍसिड असलेल्या पेप्टाइड्ससाठी, सामान्यतः जनुक अभिव्यक्ती आणि SDS-PAGE ते मिळविण्यासाठी वापरले जातात.तथापि, या पद्धतीला बराच वेळ लागतो आणि अंतिम उत्पादन पृथक्करण प्रभाव चांगला नाही.

दीर्घ पेप्टाइड संश्लेषणासाठी आव्हाने आणि उपाय

लांब पेप्टाइड्सच्या संश्लेषणात, आम्हाला नेहमी समस्येचा सामना करावा लागतो, तो म्हणजे, संक्षेपण प्रतिक्रियेचा स्टेरिक अडथळा संश्लेषणातील अनुक्रम वाढल्याने वाढतो आणि प्रतिक्रिया पूर्ण करण्यासाठी प्रतिक्रिया वेळ समायोजित करणे आवश्यक आहे.तथापि, प्रतिक्रियेचा वेळ जितका जास्त असेल तितके अधिक दुष्परिणाम तयार होतात आणि लक्ष्य पेप्टाइडचा एक भाग तयार होतो.असे अवशेष - कमतरता असलेल्या पेप्टाइड साखळी ही दीर्घ पेप्टाइड संश्लेषणात निर्माण होणारी प्रमुख अशुद्धता आहे.म्हणून, लाँग पेप्टाइडच्या संश्लेषणामध्ये, आपण ज्या प्रमुख समस्येवर मात केली पाहिजे ती म्हणजे उच्च दर्जाच्या प्रतिक्रिया परिस्थिती आणि प्रतिक्रिया पद्धतींचा शोध घेणे, जेणेकरून अमीनो ऍसिड कंडेन्सेशन प्रतिक्रिया अधिक व्यापक आणि पूर्ण होईल.याव्यतिरिक्त, प्रतिक्रियेची वेळ कमी करा, कारण प्रतिक्रियेचा वेळ जितका जास्त असेल तितका जास्त अनियंत्रित साइड रिअॅक्शन, अधिक जटिल उप-उत्पादने.म्हणून, खालील तीन मुद्दे सारांशित केले आहेत:

मायक्रोवेव्ह संश्लेषण वापरले जाऊ शकते: संश्लेषण प्रक्रियेत आलेल्या काही अमीनो ऍसिडसाठी, जे एकत्रित करणे सोपे नाही, मायक्रोवेव्ह संश्लेषण वापरले जाऊ शकते.या पद्धतीचे उल्लेखनीय परिणाम आहेत, आणि प्रतिक्रिया वेळ मोठ्या प्रमाणात कमी करते आणि दोन मुख्य उप-उत्पादनांची निर्मिती कमी करते.

तुकडा संश्लेषण पद्धत वापरली जाऊ शकते: जेव्हा काही पेप्टाइड्स सामान्य संश्लेषण पद्धतींद्वारे संश्लेषित करणे कठीण असते आणि शुद्ध करणे सोपे नसते, तेव्हा आम्ही पेप्टाइडच्या एका विशिष्ट विभागातील अनेक अमीनो ऍसिडचे संपूर्ण संक्षेपण संपूर्णपणे पेप्टाइड शृंखलापर्यंत स्वीकारू शकतो.ही पद्धत संश्लेषणातील अनेक समस्या सोडवू शकते.

Acylhydrazide संश्लेषण वापरले जाऊ शकते: पेप्टाइड्सचे ऍसिलहायड्राझाइड संश्लेषण ही एन-टर्मिनल सायस पेप्टाइड आणि सी-टर्मिनल पॉलीपेप्टाइड हायड्रॅझाइड रासायनिक निवडक प्रतिक्रिया अमाइड बाँड्सच्या निर्मिती दरम्यान पेप्टाइड बाँडिंग पद्धत साध्य करण्यासाठी घन-फेज संश्लेषणाची एक पद्धत आहे.पेप्टाइड साखळीतील सायसच्या स्थितीवर आधारित, ही पद्धत संपूर्ण पेप्टाइड साखळीला अनेक अनुक्रमांमध्ये विभाजित करते आणि अनुक्रमे त्यांचे संश्लेषण करते.शेवटी, लक्ष्य पेप्टाइड लिक्विड-फेज कंडेन्सेशन प्रतिक्रियाद्वारे प्राप्त केले जाते.ही पद्धत केवळ दीर्घ पेप्टाइडच्या संश्लेषणाची वेळ कमी करते, परंतु अंतिम उत्पादनाची शुद्धता देखील लक्षणीयरीत्या वाढवते.

लांब पेप्टाइड शुद्धीकरण

लांब पेप्टाइड्सचे वैशिष्ट्य अपरिहार्यपणे क्रूड पेप्टाइड्सचे जटिल घटक बनवते.त्यामुळे एचपीएलसीद्वारे लांब पेप्टाइड्सचे शुद्धीकरण करणे हेही आव्हान आहे.पॉलिपेप्टाइड शुध्दीकरण प्रक्रियेची amyloid मालिका, भरपूर अनुभव शोषून घेते आणि लांब पेप्टाइड शुद्धीकरणात यशस्वीरित्या वापरली जाते.नवीन उपकरणांचा अवलंब करून, एकाधिक शुद्धीकरण प्रणालींचे मिश्रण, पुनरावृत्ती पृथक्करण आणि इतर अनुभव पद्धती, दीर्घ पेप्टाइड शुद्धीकरणाच्या यशाचा दर मोठ्या प्रमाणात सुधारला गेला.