रीकॉम्बीनंट प्रोटीन प्रतिजनांमध्ये अनेकदा विविध एपिटोप्स असतात, ज्यापैकी काही अनुक्रम एपिटॉप्स असतात आणि काही स्ट्रक्चरल एपिटॉप्स असतात.विकृत प्रतिजनांसह प्राण्यांना लसीकरण करून मिळविलेले पॉलीक्लोनल अँटीबॉडी हे वैयक्तिक एपिटोप्ससाठी विशिष्ट प्रतिपिंडांचे मिश्रण असतात आणि सामान्यतः नैसर्गिक संरचना किंवा विकृत लक्ष्य प्रथिने शोधण्यासाठी वापरले जाऊ शकतात.इम्युनोजेन्स म्हणून विकृत प्रथिने वापरण्याचा एक साइड फायदा असा आहे की विकृत प्रथिने अधिक इम्युनोजेनिक असतात आणि प्राण्यांमध्ये मजबूत रोगप्रतिकारक प्रतिक्रिया उत्तेजित करू शकतात.
Escherichia coli ची अभिव्यक्ती प्रणाली सामान्यतः प्रतिजैनिक हेतूंसाठी निवडली जाते कारण ती वेळ आणि पैशाच्या दृष्टीने सर्वात महाग प्रणाली आहे.लक्ष्य प्रथिने अभिव्यक्तीची शक्यता आणि शुद्धीकरणाची सोय सुधारण्यासाठी, काहीवेळा लक्ष्य प्रोटीनचा एक छोटासा तुकडा, जसे की विशिष्ट डोमेन, व्यक्त केला जातो.
प्रथिनांची त्रिमितीय रचना
प्रथिनांचे विशिष्ट डोमेन
जर प्रतिपिंड तयार करण्याचा उद्देश केवळ wb शोधणे असेल तर, प्रतिजन म्हणून कृत्रिम लहान पेप्टाइड वापरणे किफायतशीर आणि जलद आहे, परंतु पेप्टाइड विभागाच्या अयोग्य निवडीमुळे कमकुवत इम्युनोजेनिसिटी किंवा नॉन-रेजेनिसिटीचा धोका असतो.प्रतिपिंड तयार करण्यासाठी दीर्घ कालावधी आवश्यक असल्याने, प्रयोगाच्या यशाचा दर सुनिश्चित करण्यासाठी पॉलीपेप्टाइड प्रतिजन वापरून प्रतिपिंड तयार करण्यासाठी दोन किंवा तीन भिन्न पेप्टाइड विभाग निवडले जातात.
लसीकरणासाठी पॉलीपेप्टाइड प्रतिजनची शुद्धता 80% पेक्षा जास्त असणे आवश्यक आहे.जरी उच्च शुद्धता सैद्धांतिकदृष्ट्या चांगल्या विशिष्टतेसह ऍन्टीबॉडीज मिळवू शकते, व्यवहारात, प्राणी नेहमी मोठ्या संख्येने गैर-विशिष्ट ऍन्टीबॉडीज तयार करतात, त्यामुळे प्रतिजन शुद्धतेचे फायदे लपवतात.
याव्यतिरिक्त, लहान पेप्टाइड्सपासून ऍन्टीबॉडीज तयार करणे योग्य वाहक प्रतिजनाशी क्रॉस-लिंक केलेले असणे आवश्यक आहे ज्यामुळे त्याची इम्युनोजेनिकता वाढते.दोन सामान्य प्रतिजैनिक वाहक KLH आणि BSA आहेत.
पोस्ट वेळ: मार्च-23-2023