एचपीएलसी अयशस्वी आणि उपायांसाठी सर्वात जास्त प्रवण

उच्च-परिशुद्धता साधन म्हणून, HPLC वापरताना योग्य प्रकारे ऑपरेट न केल्यास ते सहजपणे काही त्रासदायक लहान समस्या निर्माण करू शकते.सर्वात सामान्य समस्यांपैकी एक म्हणजे कॉलम कॉम्प्रेशन समस्या.दोषपूर्ण क्रोमॅटोग्राफचे त्वरीत समस्यानिवारण कसे करावे.एचपीएलसी प्रणालीमध्ये मुख्यतः जलाशयाची बाटली, एक पंप, एक इंजेक्टर, एक स्तंभ, एक स्तंभ तापमान कक्ष, एक डिटेक्टर आणि डेटा प्रोसेसिंग सिस्टम असते.संपूर्ण प्रणालीसाठी, खांब, पंप आणि डिटेक्टर हे प्रमुख घटक आहेत आणि समस्यांना प्रवण असलेली मुख्य ठिकाणे आहेत.

स्तंभ दाबाची गुरुकिल्ली म्हणजे एचपीएलसी वापरताना ज्या क्षेत्राकडे बारकाईने लक्ष देणे आवश्यक आहे.स्तंभाच्या दाबाची स्थिरता क्रोमॅटोग्राफिक शिखर आकार, स्तंभ कार्यक्षमता, पृथक्करण कार्यक्षमता आणि धारणा वेळ यांच्याशी जवळून संबंधित आहे.स्तंभ दाब स्थिरतेचा अर्थ असा नाही की दाब मूल्य स्थिर मूल्यावर स्थिर आहे, परंतु दबाव चढउतार श्रेणी 345kPa किंवा 50PSI दरम्यान आहे (स्तंभाचा दाब स्थिर असताना आणि हळूहळू बदलत असताना ग्रेडियंट इल्यूशनचा वापर करण्यास अनुमती देते).खूप जास्त किंवा खूप कमी दाब ही स्तंभ दाब समस्या आहे.

एचपीएलसी अयशस्वी आणि उपायांसाठी सर्वात जास्त प्रवण

1, HPLC च्या वापरामध्ये उच्च दाब ही सर्वात सामान्य समस्या आहे.याचा अर्थ अचानक दबाव वाढणे.सर्वसाधारणपणे, खालील कारणे आहेत: (1) सर्वसाधारणपणे, हे प्रवाह वाहिनीच्या अडथळ्यामुळे होते.या टप्प्यावर, आपण ते तुकड्यानुसार तपासले पाहिजे.aप्रथम, व्हॅक्यूम पंपचे इनलेट कापून टाका.या टप्प्यावर, PEEK ट्यूब द्रवाने भरलेली होती जेणेकरून द्रव इच्छेनुसार टपकत आहे की नाही हे पाहण्यासाठी PEEK ट्यूब सॉल्व्हेंट बाटलीपेक्षा लहान होती.जर द्रव ठिबकत नसेल किंवा हळूहळू टपकत नसेल तर सॉल्व्हेंट फिल्टर हेड ब्लॉक केले जाते.उपचार: 30% नायट्रिक ऍसिडमध्ये अर्धा तास भिजवा आणि अल्ट्राप्युअर पाण्याने स्वच्छ धुवा.जर द्रव यादृच्छिकपणे ठिबकत असेल तर, सॉल्व्हेंट फिल्टर हेड सामान्य आहे आणि तपासले जात आहे;bपर्ज व्हॉल्व्ह उघडा जेणेकरून मोबाइल फेज कॉलममधून जाणार नाही आणि जर दबाव लक्षणीयरीत्या कमी झाला नाही तर फिल्टर व्हाईट हेड ब्लॉक केले जाईल.उपचार: फिल्टर केलेले व्हाईटहेड्स काढले गेले आणि अर्ध्या तासासाठी 10% आयसोप्रोपॅनॉलने सॉनिक केले गेले.दाब 100PSI पेक्षा कमी झाला असे गृहीत धरून, फिल्टर केलेले पांढरे डोके सामान्य आहे आणि ते तपासले जात आहे;cस्तंभाचा एक्झिट एंड काढा, जर दबाव कमी झाला नाही तर स्तंभ अवरोधित केला जाईल.उपचार: जर ते बफर सॉल्ट ब्लॉकेज असेल तर, दाब सामान्य होईपर्यंत 95% स्वच्छ धुवा.जर अडथळा काही जास्त प्रमाणात संरक्षित सामग्रीमुळे उद्भवला असेल तर, सामान्य दाबाकडे धावण्यासाठी सध्याच्या मोबाइल टप्प्यापेक्षा अधिक मजबूत प्रवाह वापरला जावा.जर वरील पद्धतीनुसार दीर्घकालीन साफसफाईचा दाब कमी होत नसेल, तर कॉलमचे इनलेट आणि आउटलेट याउलट इन्स्ट्रुमेंटशी जोडलेले मानले जाऊ शकते आणि कॉलम मोबाईल फेजसह साफ करता येतो.यावेळी, जर स्तंभाचा दाब अजूनही कमी झाला नाही, तर स्तंभ प्रवेशद्वार चाळणी प्लेट केवळ बदलली जाऊ शकते, परंतु एकदा ऑपरेशन चांगले नसल्यास, स्तंभाचा प्रभाव कमी करणे सोपे आहे, म्हणून कमी वापरण्याचा प्रयत्न करा.कठीण समस्यांसाठी, स्तंभ बदलण्याचा विचार केला जाऊ शकतो.

(2) चुकीचा प्रवाह दर सेटिंग: योग्य प्रवाह दर रीसेट केला जाऊ शकतो.

(३) चुकीचे प्रवाह गुणोत्तर: प्रवाहांच्या वेगवेगळ्या प्रमाणात स्निग्धता निर्देशांक भिन्न असतो आणि उच्च स्निग्धता असलेल्या प्रवाहाचा संबंधित प्रणाली दाब देखील मोठा असतो.शक्य असल्यास, कमी चिकटपणाचे सॉल्व्हेंट्स बदलले जाऊ शकतात किंवा पुन्हा सेट केले जाऊ शकतात आणि तयार केले जाऊ शकतात.

(4) सिस्टम प्रेशर झिरो ड्रिफ्ट: लिक्विड लेव्हल सेन्सरचे शून्य समायोजित करा.

2, दाब खूप कमी आहे (1) सहसा सिस्टम गळतीमुळे होतो.काय करावे: प्रत्येक कनेक्शन शोधा, विशेषत: स्तंभाच्या दोन्ही टोकांना इंटरफेस, आणि गळती क्षेत्र घट्ट करा.पोस्ट काढा आणि PTFE फिल्मला योग्य शक्तीने घट्ट करा किंवा लाइन करा.

(2) गॅस पंपमध्ये प्रवेश करतो, परंतु यावेळी दबाव सामान्यतः अस्थिर असतो, उच्च आणि कमी.अधिक गंभीरपणे, पंप द्रव शोषण्यास सक्षम होणार नाही.उपचार पद्धती: क्लिनिंग व्हॉल्व्ह उघडा आणि 3~5ml/min च्या प्रवाह दराने स्वच्छ करा.नसल्यास, समर्पित सुई ट्यूब वापरून एक्झॉस्ट व्हॉल्व्हवर हवेचे फुगे तयार केले जातात.

(३) मोबाईल फेज आउटफ्लो नाही: जलाशयाच्या बाटलीमध्ये मोबाईल फेज आहे का, मोबाईल फेजमध्ये सिंक बुडवला आहे की नाही आणि पंप चालू आहे की नाही हे तपासा.

(4) संदर्भ झडप बंद नाही: संदर्भ झडप घसरल्यानंतर बंद होते.हे सहसा 0.1 पर्यंत खाली जाते.संदर्भ वाल्व बंद केल्यानंतर ~ 0.2mL/ मिनिट.

सारांश:

या पेपरमध्ये, लिक्विड क्रोमॅटोग्राफीमधील फक्त सामान्य समस्यांचे विश्लेषण केले आहे.अर्थात, आमच्या व्यावहारिक अनुप्रयोगात, आम्हाला इतर समस्यांना सामोरे जावे लागेल.दोष हाताळताना, आपण खालील तत्त्वांचे पालन केले पाहिजे: काल्पनिक घटक आणि समस्या यांच्यातील संबंध निश्चित करण्यासाठी एका वेळी फक्त एक घटक बदला;सामान्यत:, समस्यानिवारणासाठी भाग बदलताना, कचरा टाळण्यासाठी आम्ही तोडलेले अखंड भाग परत जागी ठेवण्याकडे लक्ष दिले पाहिजे;चांगल्या रेकॉर्डची सवय लावणे ही दोष हाताळण्याच्या यशाची गुरुकिल्ली आहे.शेवटी, HPLC वापरताना, नमुना प्रीट्रीटमेंट आणि उपकरणांचे योग्य ऑपरेशन आणि देखभाल याकडे लक्ष देणे महत्त्वाचे आहे.